相信科研工作者们对于离心机并不陌生.离心机就是利用离心力,分离液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械.离心机主要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开,或将乳浊液中两种密度不同,又互不相溶的液体分开(例如从牛奶中分离出奶油);它也可用于排除湿固体中的液体,例如用洗衣机甩干湿衣服;特殊的超速管式分离机还可分离不同密度的气体混合物;利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点,有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级.今天要讲解的是离心机的分离方法:密度梯度离心法.密度梯度离心法可以同时使样品中几个或全部组份分离,具有很好的分辨率.
1)速率区带法(rate zonal):
根据样品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S).大致步骤如下:
在台式离心机的离心管中装入密度梯度溶液,溶液的密度从离心管顶部至底部逐渐增加(正梯度).
将所需分离的样品小心地加至密度梯度溶液的顶部.样品在梯度溶液表面形成一负梯度.
由于不同大小的粒子在离心力作用下,在梯度中移动的速度不一样,所以经过离心后会形成几条分开的样品区带.
注意:样品粒子的密度必须大于梯度液注中任一点的密度.离心过程必须在区带到达管子底部前停止.
2)等密度离心法(isopycnic):
根据粒子的不同密度来分离.离心过程中,粒子会移至与它本身密度相同的地方形成区带.
密度样度的选择要使梯度的范围包括所有待分离粒子的密度.样品可以在密度梯度液粒上面或均匀分布在密度梯度中.经离心后,样品粒子达到它们的平衡点.
上海恒远温馨提醒:注意平衡后粒子的分离完全由其密度决定,与时间无关,此时再改变台式离心机的离心转速,只能改变区带的相对位置.