ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在科研的过程中,时常可见到一些错误结果,如：标本的影响.那么,就由上海恒远生物科技有限公司为大家解读ELISA检测实验不成功的主要因素有哪几个？
第一 标本的影响
溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性.可能是溶血血清中含有过氧化酶物质（红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素）,在洗涤过程中往往难以完全洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧（O）,从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性.所以严重溶血标本禁用.
第二 标本受细菌污染
因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果.
第三 标本保存不当
在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深 造成假阳性；为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集；如不能立即测定,5d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡.
第四 标本凝固不全
在工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果；因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清.
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