鸭抗凝血素抗体（aPT1/aPT2）ELISA试剂盒-恒远生物商城-生化试剂、实验耗材一站式采购平台

【产品名称】：鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒

【产品用途】：被测样品定性定量分析

【产品规格】：96T/48T(两种规格)

【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】：2-8℃

【供货期】：1-3天(现货供应)

【产品性状】：液体盒装

【产品价格】：电议(含税含运费，我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

【ELISA检测试剂盒种属】：鹿、羊、鸡、鸭、狼、鱼、马、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、兔子、猪、猴等动植物。

【销售优势】：价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

样品采集：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

【产品保质期】：半年(六个月)

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样品浓度。

鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒组成

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶

2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（80 ng/L） 0.5ml×1 瓶

3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶

4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份

5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张

6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

40 ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

20 ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

10 ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

5ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2.5ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒计算

以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6 个月

公司实验室仪器设备清单：

酶标仪：芬兰（Labsystems Multiskan MS）

仪器型号：352型

洗板机：芬兰（Thermo Labsystems）

仪器型号：AC8

离心机：微量高速离心机（国产）

仪器型号：TG16W

培养箱：隔水式恒温培养箱（国产）

仪器型号：GNP-9080型

电镜仪器：美国FEI公司台式扫描电镜Phenom

仪器型号：TY-HRC

实时定量PCR (RT-PCR): 罗氏

仪器型号：Lightcycler 480

免疫荧光：Modulus™

鸭抗凝血素抗体(aPT1/aPT2)ELISA试剂盒数据处理及结果报告

1 计算回收率：回收率1 =

2 计算平均回收率：平均回收率 =

3 计算比例系统误差：比例系统误差 = 100% - 平均回收率

4 可接受判断：比例系统误差不大于CLIA 88允许总误差的1/2。

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