人载脂蛋白H（Apo-H）ELISA试剂盒 -恒远生物商城-生化试剂、实验耗材一站式采购平台

一.参数规格

【产品名称】：人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒

【产品用途】：被测样品定性定量分析

【产品规格】：96T/48T(两种规格)

【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】：2-8℃

【供货期】：1-3天(现货供应)

【产品性状】：液体盒装

【产品价格】：电议(含税含运费，我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

【销售优势】：价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

【试剂盒种属】：鹿、羊、鸡、鸭、狼、鱼、马、牛、人、大鼠、犬、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、兔子、猪、猴等动植物。

二.样品收集、处理及保存
1）.细胞培养上清：
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2）细胞：
用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3）血清：
在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5）体液：
包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6.）组织标本：
切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：
如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

三.ELISA试剂盒组成

产品组成	48孔配置	96孔配置	Storage
标准品：180ng/L	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃
标准品稀释液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃
酶标试剂	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
样品稀释液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
显色剂A液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
显色剂B液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
终止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃
浓缩洗涤液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃
酶标包被板	1×48	1×96	2-8℃
封板膜	2片	2片	RT
密封袋	1个	1个	RT
说明书	1份	1份	RT

四.操作步骤

五.实验原理

人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值，计算样品浓度。

实验过程

加样→ 孵育→ 检测抗体→ 显色→ 读数 →数据分析

数据处理及报告

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

六.标准曲线的绘制方法

可以采用各种绘图软件来绘制ELISA标准曲线，我公司以“Curve Exert1.3”软件为例，绘制的ELISA标准曲线如下：

计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度

七.实验注明：
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 包装：在采样、发送、运输过程中有保冷温度要求的，公司均采用加厚款生物保温箱，内装生物冰袋，有效的控制产品温度，保证货物质量不受影响，同时并填充大量EPE发泡棉，具有优越的缓冲弹性，它就像成千上万的小弹簧紧紧地保护在邮寄物品周围，它能有效的吸收严酷的冲击力，使邮寄物品免于破损，保证货物完好送达您手。