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鱼维生素K1（VK1）ELISA试剂盒

使用手册

产品编号：HB866-QT

使用前请仔细阅读本手册。如果有任何问题，请联系我们,我们会给你提供专业的技术服务。

【文献支持】

影响因子(IF)=4.55；Disruption of Abcc6 Transporter in Zebrafish Causes Ocular Calcification and Cardiac Fibrosis；华东师范大学；《INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES》

【产品名称】

中文名称：鱼维生素K1（VK1）酶联免疫试剂盒

【包装规格】

96T/盒

【预期用途】

仅供科研使用，定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液等相关样本中鱼维生素K1（VK1）的浓度。

【储存条件及有效期】

1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。

2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1 个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

【适用仪器】

半自动的酶标仪，如Thermo MK3，或者国产酶标仪。

【样本要求】

1.样本类型和采集

血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置0.5-2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

细胞裂解液: 吸弃培养液，用PBS（0.01 M，pH 7.4）将细胞洗一遍。用细胞刮刮下细胞（不能用胰酶和EDTA 处理），加入2-5 mL PBS（0.01 M，pH 7.4）。悬浮细胞可省略。收集细胞悬液，4℃ 1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。加入适量的预冷PBS或非变性细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞,通常6孔板一个孔的细胞量需要150-250μL PBS重悬。将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温解冻样品，反复冻融3次，使细胞充分裂解,也可将样品进行超声破碎，以达到裂解的目的。4℃ 10000×g 离心10min，除去细胞碎片，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.样本保存和稳定性

样本在2-8℃条件下，可以储存72h，在- 20℃或-80℃可以储存6个月及以上。样本收集后，不是一次检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融。